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HSF1双切口酶质粒(h) | sc-400432-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSF1双切口酶质粒(h2) | sc-400432-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人源 HSF1(热休克因子 1)是热休克反应的主控转录调节因子,可协调诱导分子伴侣(如 HSP70 和 HSP90)的表达,从而在细胞应激过程中维持蛋白质稳态(proteostasis)。在蛋白毒性应激条件下,HSF1 会发生三聚化并在细胞核内累积,结合热休克元件(HSE),启动影响蛋白折叠、质量控制以及适应应激的代谢等程序。HSF1 的活性还与调控细胞凋亡、自噬和未折叠蛋白反应(UPR)的通路相互交织,从而塑造细胞对氧化、热以及代谢损伤的耐受性。HSF1 信号的失调与蛋白质稳态相关疾病以及多种疾病模型中观察到的应激适应表型有关,这也支持对其应激响应型转录网络开展机制研究。
HSF1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HSF1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSF1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HSF1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HSF1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。