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Hrs双切口酶质粒(m) | sc-420851-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Hrs双切口酶质粒(m2) | sc-420851-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Hgs 编码 Hrs,这是 ESCRT-0 复合体的核心组分,负责识别泛素化货物并启动内体分选,将其导向多泡体以及溶酶体降解。Hrs 协调受体酪氨酸激酶的下调与信号终止,将内吞作用与 EGFR/MAPK、PI3K–AKT 等信号通路联系起来,并参与内体成熟与膜运输。通过在货物聚集与 ESCRT 招募中的作用,Hrs 影响自噬与内体-溶酶体系统之间的串扰以及蛋白质稳态。Hrs 依赖性运输的失调与受体信号改变以及神经退行性和致癌过程相关,因此 Hgs 是研究内体信号传导与蛋白质周转机制的一个有用节点。
Hrs 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hgs 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hgs内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hgs的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hgs基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。