Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HPK1 Antibody (G-9) Alexa Fluor® 488: sc-374183 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of HPK1 expression in BJAB (A), Raji (B) and RAW 264.7 (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker MW Tag-Alexa Fluor® 647: sc-516791.
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HPK1双切口酶质粒(h): sc-402367-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HPK1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HPK1双切酶质粒（h）和HPK1双切酶质粒（h2）编码针对MAP4K1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HPK1: sc-374183，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HPK1双切口酶质粒(h) | sc-402367-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HPK1双切口酶质粒(h2) | sc-402367-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MAP4K1 编码造血祖细胞激酶 1（HPK1），它属于 Ste20 家族的丝氨酸/苏氨酸激酶，在免疫细胞中作为 MAPK 信号通路的上游调控因子。HPK1 传递抗原受体及共刺激通路下游的信号，通过调控 ERK/JNK 级联反应、与 NF-κB 相关的信号节点以及细胞骨架重塑来塑造细胞的激活阈值。通过调节依赖磷酸化的衔接蛋白相互作用以及泛素网络相关互作，HPK1 影响 T 细胞受体信号强度、细胞因子产生程序以及免疫突触动力学。MAP4K1/HPK1 活性异常与免疫信号失衡状态相关，因此常在免疫肿瘤学与炎症相关的分子通路研究中被重点关注。
HPK1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MAP4K1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAP4K1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MAP4K1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MAP4K1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。