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HoxC6CRISPR激活质粒(h) | sc-403393-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
HOXC6 编码人类同源盒(homeobox)转录因子 HoxC6。HoxC6 是一种 DNA 结合型调控蛋白,在胚胎发育过程中参与建立前后轴(anterior–posterior)模式并影响细胞命运决定。在分化组织中,HOXC6 通过与共因子的情境依赖性相互作用来调控转录程序;这些共因子会影响染色质状态与增强子活性,从而参与控制细胞增殖、迁移以及上皮分化等过程。多种肿瘤类型中均有 HOXC6 表达失调的报道,因此常被用于研究谱系可塑性、与侵袭相关的基因表达以及分化状态的改变。作为一种具有广泛转录调控能力的发育调节因子,HOXC6 与形态发生、致癌性转录网络以及基因调控回路相关的研究密切相关。
HoxC6 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HOXC6的表达。
HoxC6 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HOXC6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HOXC6转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性HoxC6表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HOXC6位点,并能够研究内源性位点上依赖于HoxC6的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HOXC6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟HoxC6通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。