Date published: 2026-7-21

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HoxB3双切口酶质粒(h): sc-405460-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • HoxB3 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • HoxB3双切酶质粒(h)和HoxB3双切酶质粒(h2)编码针对HOXB3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    HoxB3双切口酶质粒(h)

    sc-405460-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    HoxB3双切口酶质粒(h2)

    sc-405460-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    HOXB3 编码同源盒转录因子 HoxB3,这是一种序列特异性的 DNA 结合型调控蛋白,在胚胎发育过程中帮助建立前后轴模式并决定体节身份。在人类细胞中,HoxB3 调控与谱系指定、分化以及形态发生因子驱动的信号网络相关的转录程序,这些网络共同协调染色质状态与发育基因表达。HOXB3 表达失调在多种肿瘤背景下与分化状态改变及致癌性转录调控回路有关,因此是研究发育重编程的一个重要节点。对 HOXB3 的实验性解析有助于推进对基因调控网络、细胞命运的表观遗传控制以及转录因子在不同情境下功能的研究。

    HoxB3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HOXB3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HOXB3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HOXB3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HOXB3基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。