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HoxA5双切口酶质粒(h) | sc-402499-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HoxA5双切口酶质粒(h2) | sc-402499-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HOXA5 编码同源盒转录因子 HoxA5,这是一种序列特异性的 DNA 结合调控蛋白,参与建立发育过程中的前后轴模式,并协调细胞分化相关的程序。在成人组织中,HoxA5 会影响调控上皮–间质状态、细胞外基质组织,以及情境依赖性的细胞周期与凋亡反应的转录网络。作为 HOX 基因调控回路的一部分,它与染色质及谱系决定相关通路整合,共同塑造组织身份与组织重塑。HOXA5 表达失衡或发生表观遗传沉默,已在多种组织背景中与分化状态改变及肿瘤相关的转录重编程相关联,因而支持其作为疾病模型研究中的一个机制性关键节点。
HoxA5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HOXA5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HOXA5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HOXA5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HOXA5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。