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hnRNP E1双切口酶质粒(m) | sc-423930-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
hnRNP E1双切口酶质粒(m2) | sc-423930-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Pcbp1 编码异质核核糖核蛋白 E1(hnRNP E1),这是一种 RNA 结合蛋白,能够识别 poly(C) 基序,从而调控 mRNA 的稳定性、翻译以及可变加工。hnRNP E1 参与转录后调控网络,塑造细胞周期进程、分化程序和应激响应性基因表达,并可将 RNA 调控与依赖信号的基因输出重塑相耦联。通过在核糖核蛋白复合体组装和翻译控制中的作用,hnRNP E1 影响与上皮可塑性和细胞骨架动力学相关的通路。PCBP1/hnRNP E1 活性改变与癌症相关背景及其他需要 RNA 加工保真性的重要疾病中的 RNA 代谢失调有关。
hnRNP E1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pcbp1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pcbp1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pcbp1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pcbp1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。