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hnRNP C1/C2双切口酶质粒(h) | sc-400993-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
hnRNP C1/C2双切口酶质粒(h2) | sc-400993-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HNRNPC 基因编码异质核核糖核蛋白 C1/C2(hnRNP C1/C2)。这是一类在细胞核内含量丰富的 RNA 结合蛋白,可组装到新生的 pre-mRNA 上,从而调控剪接位点选择、mRNA 成熟以及转录本稳定性。hnRNP C1/C2 通过在隐蔽的多聚尿嘧啶序列(polyuridine tracts)处与 U2AF2 竞争,帮助维持 RNA 加工的准确性,从而限制源自 Alu 序列的异常“外显子化”(exonization),并塑造不同异构体(isoform)的产出。通过这些作用,它还会影响更广泛的基因表达程序,这些程序与细胞周期控制、DNA 损伤应答和蛋白质稳态(proteostasis)相关;因此在癌症与神经退行性疾病模型中观察到的 RNA 失调研究里,hnRNP C1/C2 也是常被关注的对象。HNRNPC 表达量或功能的改变,也与先天免疫信号以及由 RNA 代谢紊乱所驱动的应激适应性转录网络变化有关。
hnRNP C1/C2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HNRNPC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HNRNPC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HNRNPC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HNRNPC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。