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Histamine H3 ReceptorCRISPR激活质粒(h) | sc-402473-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Histamine H3 ReceptorCRISPR激活质粒(h2) | sc-402473-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
HRH3 编码组胺 H3 受体,这是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 G 蛋白偶联受体(GPCR),主要在神经系统中表达,在其中作为自受体和异受体发挥作用,以调节神经递质的释放。组胺与之结合后,HRH3 信号会降低细胞内 cAMP 水平,影响离子通道活性,并塑造突触传递,从而作用于调控觉醒、认知和食欲的多条通路。通过与其他神经调质系统的串话,HRH3 参与调控神经回路中的多巴胺能、胆碱能和 5-羟色胺能张力。HRH3 表达或信号传导的改变,已在神经精神与神经退行性疾病的生物学机制、睡眠—觉醒调控以及代谢表型等研究背景中受到关注。
Histamine H3 Receptor CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HRH3的表达。
Histamine H3 Receptor CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HRH3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HRH3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histamine H3 Receptor表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HRH3位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histamine H3 Receptor的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HRH3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histamine H3 Receptor通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。