Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HIF1a双切口酶质粒(h): sc-400036-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HIF1a 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HIF1a双切酶质粒（h）和HIF1a双切酶质粒（h2）编码针对HIF1A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HIF1a: sc-13515，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HIF1a双切口酶质粒(h) | sc-400036-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HIF1a双切口酶质粒(h2) | sc-400036-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HIF1A 编码缺氧诱导因子 1α（HIF1α），它是细胞感知氧水平的核心转录因子，在低氧条件下积累并启动适应性基因程序，从而调控糖酵解、血管生成、红细胞生成以及细胞生存等过程。稳定化的 HIF1α 与 ARNT（HIF1β）形成异源二聚体，并结合缺氧反应元件（HRE），调控包括 VEGFA、SLC2A1 和 LDHA 在内的靶基因，同时整合来自 PI3K–AKT–mTOR、MAPK 以及线粒体 ROS 的信号。在常氧条件下，HIF1α 发生脯氨酸羟化修饰，进而促进 VHL 介导的泛素化并被蛋白酶体降解，使氧可用性与转录输出相耦联。HIF1A/HIF1α 活性失调与肿瘤缺氧生物学、缺血相关应激反应、炎症以及代谢重编程有关，因此在通路研究和疾病模型研究中被广泛使用。
HIF1a 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HIF1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HIF1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HIF1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HIF1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。