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HIC-1双切口酶质粒(h) | sc-402118-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HIC-1双切口酶质粒(h2) | sc-402118-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 HIC1(cancer 1 中高甲基化基因)编码 HIC-1 蛋白,它是一种含 BTB/POZ 结构域和 C2H2 锌指的转录抑制因子,能够限制与细胞增殖、DNA 损伤应答以及细胞分化相关的基因表达程序。HIC-1 通过招募共抑制因子参与染色质介导的转录抑制,并与 p53 相关的应激信号传导及转录的表观遗传调控相连接。HIC1 活性丧失常与启动子高甲基化有关,并会导致转录网络改变,从而支持肿瘤发生相关表型。作为一个调控枢纽,HIC-1 因其对细胞周期检查点、与凋亡相关的转录靶标,以及对发育基因表达的情境依赖性调控而受到研究关注。
HIC-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HIC1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HIC1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HIC1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HIC1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。