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HEXB慢病毒激活颗粒(h) | sc-404765-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
人类 HEXB 基因编码溶酶体 β-己糖胺酶的 β 亚基;该亚基与 α 亚基配对形成 Hex A,与自身配对形成 Hex B,从而实现对 GM2 神经节苷脂及相关糖缀合物的逐步降解。该溶酶体水解酶活性支持糖鞘脂分解代谢、内体-溶酶体稳态维持,以及在自噬与囊泡运输过程中对膜来源底物的周转。HEXB 功能异常会扰乱神经节苷脂清除与溶酶体底物处理,使其成为研究溶酶体贮积功能障碍机制及其对神经元与胶质细胞生物学下游影响的关键节点。因此,HEXB 与用于探究脂质代谢、以溶酶体为中心的应激反应,以及连接底物累积与细胞功能障碍的相关通路的模型密切相关。
HEXB 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 HEXB 表达。
HEXB 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在HEXB转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HEXB表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 HEXB 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。