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HES1双切口酶质粒(h) | sc-400387-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HES1双切口酶质粒(h2) | sc-400387-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HES1 编码一种碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)型转录抑制因子,是 Notch 信号通路经典的下游效应分子。它通过抑制谱系特异性的转录程序来维持祖细胞状态。HES1 可结合 N-box/E-box 基序并招募共抑制复合体,从而在神经、内分泌和造血等背景中协同调控细胞周期控制、分化时序与组织模式形成。HES1 的活性还与 Wnt、Hedgehog 和 TGF-β 等通路整合,以在发育过程中精细调节命运决定以及转录振荡动力学。HES1 表达或 Notch–HES1 轴活性失调,与多种疾病相关模型中观察到的异常分化与增殖程序有关,包括发育障碍和致癌信号背景等。
HES1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HES1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HES1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HES1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HES1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。