Date published: 2026-7-25

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Helios双切口酶质粒(h2): sc-402984-NIC-2

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Helios 双切口酶质粒(h2)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Helios双切酶质粒(h2)和Helios双切酶质粒(h22)编码针对IKZF2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Helios: sc-390357,通过WB, IF或者IHC分析
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    Helios双切口酶质粒(h2)

    sc-402984-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    人类 IKZF2 编码 Helios,这是一种 Ikaros 家族的锌指转录因子,能够与 DNA 结合并调控基因表达程序,从而决定淋巴细胞谱系承诺、胸腺细胞成熟以及 T 细胞的功能性分化。Helios 参与与染色质相关的转录网络,塑造 TCR 驱动的激活过程、细胞因子信号应答以及免疫耐受的表观遗传调控,在调节性 T 细胞稳定性与免疫稳态维持中发挥重要作用。IKZF2/Helios 的表达或活性发生改变与免疫失衡及血液系统恶性肿瘤等情境相关,包括 T 细胞分化状态的变化以及白血病相关转录谱的异常。IKZF2 的研究工具可支持机制研究,例如解析转录因子在基因组上的占位、基因调控回路以及细胞状态转换,并可在人类免疫学模型中结合 CRISPR 介导的扰动、报告基因实验与多组学分析加以开展。

    Helios 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IKZF2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IKZF2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IKZF2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IKZF2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。