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Helios双切口酶质粒(h2) | sc-402984-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 IKZF2 编码 Helios,这是一种 Ikaros 家族的锌指转录因子,能够与 DNA 结合并调控基因表达程序,从而决定淋巴细胞谱系承诺、胸腺细胞成熟以及 T 细胞的功能性分化。Helios 参与与染色质相关的转录网络,塑造 TCR 驱动的激活过程、细胞因子信号应答以及免疫耐受的表观遗传调控,在调节性 T 细胞稳定性与免疫稳态维持中发挥重要作用。IKZF2/Helios 的表达或活性发生改变与免疫失衡及血液系统恶性肿瘤等情境相关,包括 T 细胞分化状态的变化以及白血病相关转录谱的异常。IKZF2 的研究工具可支持机制研究,例如解析转录因子在基因组上的占位、基因调控回路以及细胞状态转换,并可在人类免疫学模型中结合 CRISPR 介导的扰动、报告基因实验与多组学分析加以开展。
Helios 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IKZF2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IKZF2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IKZF2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IKZF2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。