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HAUSP双切口酶质粒(h) | sc-402013-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HAUSP双切口酶质粒(h2) | sc-402013-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP7 编码去泛素化酶 HAUSP,它是一种泛素特异性蛋白酶,能够从关键调控蛋白上移除泛素,从而调控这些蛋白的稳定性、定位与活性。HAUSP 是泛素依赖性蛋白质稳态(proteostasis)的核心组成部分,并通过调节 p53、MDM2 等因子参与 DNA 损伤应答、细胞周期调控以及染色质相关过程。通过这些相互作用,USP7 影响检查点信号传导、复制压力的应对以及维持基因组完整性的转录程序。USP7 活性失调与多种疾病相关背景下观察到的异常泛素信号有关,包括致癌通路与神经发育表型,因此常被作为机制研究的重点靶点。
HAUSP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 USP7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对USP7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏USP7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了USP7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。