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HAS3双切口酶质粒(h) | sc-401531-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HAS3双切口酶质粒(h2) | sc-401531-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
透明质酸合成酶3(HAS3)是一种与细胞膜相关的糖基转移酶,催化透明质酸的合成;透明质酸是细胞外基质中重要的糖胺聚糖成分。HAS3通过调控细胞周围透明质酸的丰度,影响细胞黏附、迁移、增殖以及炎症信号传导;其中包括与CD44和RHAMM的相互作用,将细胞外基质重塑与细胞骨架动态变化相耦联。HAS3活性有助于组织水合与屏障功能,并可调节创伤修复以及基质—上皮间的串话。HAS3表达及透明质酸代谢的异常与纤维化、慢性炎症以及肿瘤微环境重塑相关,因此可作为研究由细胞外基质驱动表型的机制性研究靶点。
HAS3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HAS3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HAS3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HAS3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HAS3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。