Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
hamartin Antibody (C-8): sc-377386. Western blot analysis of hamartin expression in untreated K-562 (A), chemically-treated K-562 (B), untreated HCT-116 (C) and chemically-treated HCT-116 (D) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG2b BP-HRP: sc-542741. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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hamartin双切口酶质粒(h): sc-402444-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- hamartin 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- hamartin双切酶质粒（h）和hamartin双切酶质粒（h2）编码针对TSC1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：hamartin: sc-377386，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
hamartin双切口酶质粒(h) | sc-402444-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
hamartin双切口酶质粒(h2) | sc-402444-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TSC1 编码 hamartin（哈马汀蛋白），它是 TSC1–TSC2 复合体的核心组分。该复合体整合营养和生长因子信号，通过调控小 GTP 酶 Rheb 来抑制 mTORC1 信号。通过精细调节 mTORC1 依赖的蛋白质合成、自噬和细胞代谢，hamartin 参与控制细胞生长、增殖以及应激反应。TSC1 的功能受损会扰乱 PI3K–AKT–mTOR 通路的稳态，并改变下游的翻译与溶酶体相关程序。TSC1 的遗传变异或功能缺失与结节性硬化症复合征（TSC）的生物学及相关的 mTOR 驱动细胞表型密切相关，因此它常被用作研究该通路与疾病机制的重要节点。
hamartin 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TSC1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TSC1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TSC1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TSC1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。