Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
H-Ras Antibody (259): sc-35. Western blot analysis of H-Ras expression in K-562 (A), HeLa (B), Jurkat (C), NIH/3T3 (D), A-431 (E) and MCF7 (F) whole cell lysates.
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H-Ras双切口酶质粒(h): sc-400204-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- H-Ras 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- H-Ras双切酶质粒（h）和H-Ras双切酶质粒（h2）编码针对HRAS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：H-Ras: sc-53959，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
H-Ras双切口酶质粒(h) | sc-400204-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
H-Ras双切口酶质粒(h2) | sc-400204-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HRAS 编码人类小GTP酶 H-Ras。H-Ras 是一种与细胞膜相关的分子开关，可在结合 GDP 与结合 GTP 的状态之间循环转换，将受体酪氨酸激酶及其他上游输入产生的信号向下游传递。被激活的 H-Ras 会启动 RAF–MEK–ERK 和 PI3K–AKT 信号通路，整合调控细胞增殖、分化、细胞骨架动态以及存活等过程的多种线索。GEF 和 GAP 对 GTP 水解的精确调控对于维持正常的信号强度与持续时间至关重要；RAS 信号失调与致癌性转化及异常生长程序密切相关。因此，HRAS 常被用作模型基因位点，用于解析人类细胞中 MAPK 通路的调控机制、反馈控制以及情境依赖的信号输出。
H-Ras 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HRAS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HRAS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HRAS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HRAS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。