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Gα i-2双切口酶质粒(h) | sc-400568-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Gα i-2双切口酶质粒(h2) | sc-400568-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GNAI2 编码人类异源三聚体 G 蛋白的 α 亚基 Gαi-2。该蛋白是一种受 GDP/GTP 调控的信号转导因子,可将被激活的 GPCR 与腺苷酸环化酶抑制相连接,从而降低 cAMP 的生成。通过与 GPCR 依赖性通路偶联,Gαi-2 调控 PKA 信号、离子通道调节、MAPK 输出以及 PI3K 依赖过程,进而影响多种细胞类型中的趋化、分泌与增殖反应。GNAI2 的活性还会通过 Gβγ 信号以及 GRK/β-arrestin 网络与受体去敏化和转运过程整合,共同设定信号的强度与持续时间。Gαi-2 信号失调与免疫细胞迁移改变及异常生长信号环境相关,因此可用于研究炎症与肿瘤发生相关机制,但不暗示任何临床用途。
Gα i-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GNAI2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GNAI2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GNAI2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GNAI2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。