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Gα 11双切口酶质粒(h) | sc-401653-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Gα 11双切口酶质粒(h2) | sc-401653-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GNA11 编码人类异源三聚体 G 蛋白 α 亚基 Gα11,是质膜上 Gq/11 偶联 GPCR 信号传导的关键转导因子。受体被激活后,Gα11 刺激磷脂酶 C-β(PLC-β),提高 IP3 和 DAG 水平,从而驱动细胞内 Ca2+ 动员并激活蛋白激酶 C(PKC),并进一步影响 MAPK 及其他第二信使通路。该信号轴在多种细胞类型中调控增殖、分泌、细胞骨架动态以及受体去敏化。GNA11 活性失衡与致癌信号以及内分泌和黑色素细胞生物学的改变有关,因此在疾病相关模型中是进行通路解析的一个重要节点。
Gα 11 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GNA11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GNA11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GNA11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GNA11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。