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GSTM1双切口酶质粒(h) | sc-418201-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GSTM1双切口酶质粒(h2) | sc-418201-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 **GSTM1** 基因编码谷胱甘肽 S-转移酶 μ1(glutathione S-transferase mu 1),这是一种 II 期解毒酶,可催化谷胱甘肽与亲电性外源性化合物以及内源性反应性代谢产物发生结合反应。通过限制氧化应激以及由脂质过氧化产生的加合物,GSTM1 有助于维持氧化还原稳态,并参与与 NRF2 调控的抗氧化反应相交汇的细胞防御通路。GSTM1 的基因缺失或活性降低与个体间对化学物质易感性和炎症信号差异有关,且常在研究致癌物代谢以及呼吸道与肝脏生物学中的氧化损伤时被重点关注。GSTM1 功能改变也与人类细胞中环境暴露应答以及药物代谢差异性的研究相关。
GSTM1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GSTM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GSTM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GSTM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GSTM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。