Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GRASP65 Antibody (D-12): sc-374423. Western blot analysis of GRASP65 expression in Hep G2 (A), HeLa (B), MCF7 (C), OVCAR-3 (D) and A549 (E) whole cell lysates.
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GRASP65双切口酶质粒(h): sc-402436-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GRASP65 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GRASP65双切酶质粒（h）和GRASP65双切酶质粒（h2）编码针对GORASP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GRASP65: sc-374423，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GRASP65双切口酶质粒(h) | sc-402436-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GRASP65双切口酶质粒(h2) | sc-402436-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GORASP1 编码 GRASP65，这是一种外周膜高尔基体蛋白，有助于维持高尔基体堆叠结构，并通过受调控的寡聚化以及与 golgin 蛋白和囊泡系链因子的相互作用，支持扁囊（cisternae）的堆叠与高尔基带（ribbon）的形成。GRASP65 促进有丝分裂后的高尔基体重组，并参与分泌途径中的膜运输与蛋白分选，从而影响依赖糖基化的货物加工过程。其依赖磷酸化的动态变化将高尔基体组织与细胞周期进程相耦联，并参与在应激反应中对分泌性细胞器区室的重塑。与 GRASP65 相关的高尔基体结构与运输程序异常，已与以蛋白质稳态受损和异常分泌为特征的病理状态相关，包括神经退行性变以及与癌症相关的细胞生物学过程。
GRASP65 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GORASP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GORASP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GORASP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GORASP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。