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GRASP55双切口酶质粒(h) | sc-401106-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GRASP55双切口酶质粒(h2) | sc-401106-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类基因 GORASP2 编码 GRASP55,这是一种参与高尔基体重组与堆叠的蛋白质,有助于维持高尔基体扁囊的组织结构,并支持内质网(ER)与高尔基体之间的囊泡系留与膜运输。GRASP55 参与高尔基体带状结构(Golgi ribbon)的形成,并与非经典蛋白分泌有关,从而促进蛋白质稳态以及应激适应性的运输程序。干扰依赖 GRASP55 的高尔基体结构会改变糖基化、分泌以及细胞信号输出,而这些过程常在癌症、神经退行性疾病和炎症状态中发生重塑。因此,GORASP2 是一个有价值的基因位点,可用于解析高尔基体结构如何与分泌通路稳态及疾病相关的细胞表型相互关联。
GRASP55 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GORASP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GORASP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GORASP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GORASP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。