Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GR Antibody (G-5) Alexa Fluor® 488: sc-393232 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of GR expression in A-431 (A), HeLa (C) and NIH/3T3 (D) whole cell lysates and A-431 nuclear extract (B). Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor双切口酶质粒(h): sc-400071-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor双切酶质粒（h）和GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor双切酶质粒（h2）编码针对NR3C1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor: sc-393232，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor双切口酶质粒(h) | sc-400071-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor双切口酶质粒(h2) | sc-400071-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NR3C1 编码糖皮质激素受体（GR），这是一种配体激活的核受体，可将皮质醇及合成糖皮质激素信号转化为依赖具体情境的转录程序。激素结合后，GR 发生伴侣蛋白依赖性的激活、转位入核，并在糖皮质激素反应元件（GRE）处与 DNA 结合，同时还可调控 NF-κB、AP-1 等其他转录因子。通过这些机制，GR 调节炎症与免疫信号、细胞代谢、与昼夜节律相关的应激反应以及细胞凋亡，在内分泌与细胞因子通路之间整合多种信号线索。NR3C1 信号或表达失衡与糖皮质激素耐受及应激轴调控异常有关，并与炎症性疾病和激素反应性肿瘤相关；在这些情境中，GR 可影响细胞增殖及治疗反应。
GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NR3C1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR3C1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NR3C1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NR3C1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。