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GPNMB慢病毒激活颗粒(h) | sc-402966-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
GPNMB(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,非转移性黑色素瘤糖蛋白B)是一种I型跨膜糖蛋白,在髓系细胞谱系和破骨细胞中富集,可调控细胞黏附、迁移以及细胞外基质重塑。它参与免疫与炎症信号程序,影响溶酶体与囊泡运输,并通过与整合素及生长因子相关通路的串扰来塑造组织修复反应。在肿瘤生物学中,GPNMB表达的改变与肿瘤细胞侵袭性、基质相互作用以及免疫微环境重塑相关;而在神经退行性疾病中,它与小胶质细胞的激活状态及对损伤反应的转录网络相关。这些特征使GPNMB成为在人源模型系统中解析髓系极化、骨免疫学以及应激适应性细胞表型机制的一个有用关键节点。
GPNMB 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GPNMB 表达。
GPNMB 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GPNMB转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GPNMB表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GPNMB 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。