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GlyR α2双切口酶质粒(h) | sc-402179-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GlyR α2双切口酶质粒(h2) | sc-402179-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GLRA2 编码甘氨酸受体 α2(GlyR α2)亚基。该受体属于 Cys-loop 受体家族,是一种配体门控氯离子通道,在中枢神经系统介导快速的抑制性神经传递。GlyR α2 参与突触内及突触外的甘氨酸能信号传导,通过氯离子电导塑造神经元兴奋性、网络同步以及兴奋与抑制之间的平衡。该受体还参与包括突触成熟和神经环路精细化在内的神经发育过程,其功能与调控抑制性突触传递和离子稳态的相关通路相互交织。遗传学与功能学研究表明,甘氨酸能信号异常以及 GLRA2 序列或表达的改变与神经发育表型、癫痫相关或兴奋性障碍有关,支持其在机制性神经科学研究中的重要性。
GlyR α2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GLRA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GLRA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GLRA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GLRA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。