Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-417499

概述

GSR 编码人源谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase），这是一种 FAD 依赖性的氧化还原酶，利用 NADPH 将氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH），从而维持细胞内氧化还原稳态。通过维持 GSH 储备，GSR 支持活性氧（ROS）的解毒，保护蛋白质巯基状态，并在细胞质与线粒体区室中调控对氧化还原敏感的信号传导。该活性与磷酸戊糖途径等产生 NADPH 的代谢通路相衔接，并在氧化、代谢及炎症应激过程中参与细胞防御。GSR 功能或表达的异常常在氧化还原失衡相关研究中被关注，包括溶血性表型、神经退行性过程以及癌细胞对氧化应激的适应等情境。

Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中GSR基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对GSR基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏GSR开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Glutathione reductase蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建GSR缺失的细胞模型，用于Glutathione reductase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Glutathione reductase 功能至关重要的 GSR 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 GSR 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 GSR 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Glutathione reductase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Glutathione reductase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由GSR同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定GSR靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。