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Glutathione Peroxidase 4/GPX4双切口酶质粒(m) | sc-436949-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Gpx4 编码谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4),这是一种硒酶,利用谷胱甘肽还原细胞膜内的磷脂氢过氧化物,从而维持膜完整性与氧化还原稳态。GPX4 通过限制铁驱动的脂质过氧化作用,是铁死亡(ferroptosis)的核心抑制因子,并与谷胱甘肽代谢、NRF2 调控的氧化应激反应等抗氧化网络相互交织。GPX4 功能的扰动会改变线粒体与脂质信号传导,影响炎症性应激反应,并在氧化与代谢应激条件下左右细胞存活。GPX4 活性失衡因其对脂质过氧化及铁死亡敏感性的调控,在神经退行性病变、缺血-再灌注损伤和肿瘤生物学等实验模型中被认为与相关表型有关。
Glutathione Peroxidase 4/GPX4 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Gpx4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gpx4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Gpx4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Gpx4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。