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Gl Syn双切口酶质粒(h) | sc-401090-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Gl Syn双切口酶质粒(h2) | sc-401090-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GLUL 编码谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,Gl Syn),这是一种关键的胞质酶,催化谷氨酸与氨在 ATP 依赖条件下转化为谷氨酰胺,从而支持氮同化并维持氨基酸稳态。通过调控细胞内谷氨酰胺库,GLUL 影响中心碳代谢、补料反应(anaplerosis)以及与核苷酸和蛋白质合成相关的生物合成通路。GLUL 活性与谷氨酸–谷氨酰胺循环、氧化还原平衡以及细胞对营养可用性的应答相互整合。GLUL 表达或功能失调与癌症生物学、神经系统生理以及肝脏相关代谢过程中的代谢状态改变有关,因此在研究代谢重编程机制时具有重要意义。
Gl Syn 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GLUL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GLUL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GLUL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GLUL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。