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GGT5双切口酶质粒(h) | sc-405055-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GGT5双切口酶质粒(h2) | sc-405055-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 GGT5 基因编码 γ-谷氨酰转移酶 5(gamma-glutamyltransferase 5),这是一种位于细胞表面的外酶,可催化参与谷胱甘肽和白三烯代谢的 γ-谷氨酰转移反应。通过处理 γ-谷氨酰底物,GGT5 促进细胞外谷胱甘肽周转、氨基酸回收以及氧化还原稳态,并进一步影响氧化应激信号与炎症通路。其活性还通过对白三烯 C4 的转化与类二十烷酸生物学相交汇,进而影响免疫细胞与上皮细胞等情境下的细胞应答。GGT5 的表达或活性改变已被用于探究与组织炎症、代谢应激以及肿瘤相关微环境过程的关系,因此在氧化还原与脂质介质网络的机制研究中具有相关性。
GGT5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GGT5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GGT5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GGT5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GGT5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。