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GCKR双切口酶质粒(h) | sc-401623-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GCKR双切口酶质粒(h2) | sc-401623-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GCKR 编码葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP),是一种在肝细胞中富集的葡萄糖感知调节因子,可根据代谢信号通过隔离与释放来控制葡萄糖激酶(GCK)的活性。通过调控肝脏糖酵解通量、糖原合成以及从头脂肪生成,GCKR 影响碳水化合物—脂质稳态与胰岛素相关信号通路的核心环节。GCKR 的遗传变异或表达改变与空腹血糖、甘油三酯水平及更广泛的代谢性状表型变化相关,因此是研究能量平衡与营养响应型转录程序的一个重要节点。围绕 GCKR 的研究有助于在相关细胞模型中对肝脏代谢、内分泌串扰以及代谢应激反应进行机制层面的解析。
GCKR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GCKR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GCKR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GCKR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GCKR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。