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GCC2慢病毒激活颗粒(h) | sc-411304-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
人类 GCC2 基因编码一种卷曲螺旋结构的 Golgin 家族蛋白,定位于反式高尔基网络(TGN),并参与高尔基体的组织维持、囊泡系留以及分泌与内吞转运系统中的货物分选。通过支持膜运输动态过程,GCC2 会影响蛋白糖基化、受体回收,以及信号组分在空间上的协调等过程。高尔基体结构与转运通路的紊乱与细胞应激反应、以及多种疾病背景下观察到的异常信号行为具有广泛关联,因此 GCC2 是研究细胞器稳态的一个有用节点。因此,GCC2 相关机制也有助于探究在人类细胞中,转运缺陷如何重塑蛋白稳态(proteostasis)与信号转导。
GCC2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GCC2 表达。
GCC2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GCC2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GCC2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GCC2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。