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GBP3双切口酶质粒(h) | sc-402792-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GBP3双切口酶质粒(h2) | sc-402792-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
鸟苷酸结合蛋白3(GBP3)是一种由人类干扰素诱导表达的大型 GTP 酶,在病原体侵袭和炎症信号传导过程中,作为细胞内在免疫的一部分发挥作用。作为 GBP 家族成员,GBP3 参与干扰素刺激基因网络,促进抗微生物防御机制,并可影响塑造细胞因子应答的先天免疫通路。GBP3 的活性通常与干扰素/JAK–STAT 驱动的转录程序相关,也与更广泛的宿主防御过程有关,例如炎性小体相关信号传导和应激反应。在炎症和感染性疾病背景下,已观察到干扰素信号失调以及 GBP3 表达改变,因此 GBP3 对研究免疫激活及免疫相关病理的作用机制具有重要意义。
GBP3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GBP3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GBP3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GBP3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GBP3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。