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galectin-4双切口酶质粒(h) | sc-404255-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
galectin-4双切口酶质粒(h2) | sc-404255-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LGALS4 编码半乳糖凝集素-4(galectin-4),这是一种富集于肠道与上皮组织的 β-半乳糖苷结合凝集素,主要在细胞表面及细胞外环境中发挥作用,用于组织糖链依赖性的相互作用。通过结合特定的糖蛋白与糖脂,半乳糖凝集素-4 促进上皮极性建立、黏着连接/紧密连接的稳定,并调控细胞-细胞及细胞-基质黏附,从而影响细胞迁移与屏障稳态。半乳糖凝集素-4 的活性还通过调节受体聚簇与内吞转运,与黏膜免疫和炎症信号相关过程发生交叉。LGALS4 表达失衡与上皮分化异常及结直肠疾病等情境有关,因此可作为解析糖链介导信号传导与屏障生物学的有用靶点。
galectin-4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LGALS4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LGALS4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LGALS4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LGALS4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。