
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GABARAPL1CRISPR激活质粒(h) | sc-403288-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
GABARAPL1(γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白样1)是ATG8家族的一种泛素样修饰因子,可与磷脂酰乙醇胺(PE)发生共轭,从而支持自噬体的形成、货物募集以及自噬体与溶酶体的融合。它参与包括线粒体自噬(mitophagy)和聚集体自噬(aggrephagy)在内的选择性自噬程序,并通过与含LIR基序的适配蛋白相互作用,促进细胞内运输和细胞器稳态的维持。通过塑造蛋白质稳态与应激反应,GABARAPL1影响与营养感知和细胞质量控制相关的信号网络,包括与mTOR及溶酶体功能协同调控的通路。GABARAPL1表达或自噬通量的改变与神经退行性变、癌细胞存活以及心代谢应激等相关表型有关,因此可用于开展疾病相关蛋白质稳态机制研究。
GABARAPL1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性GABARAPL1的表达。
GABARAPL1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的GABARAPL1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于GABARAPL1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性GABARAPL1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的GABARAPL1位点,并能够研究内源性位点上依赖于GABARAPL1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在GABARAPL1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟GABARAPL1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。