GABA T-3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403545

概述

SLC6A11 编码 GABA 转运体 3（GABA T-3），这是一种 Na⁺/Cl⁻ 依赖性的溶质载体，可介导高亲和力地将细胞外空间中的 γ-氨基丁酸（GABA）再摄取，从而调控抑制性神经传递。通过控制突触内及突触外 GABA 的可用性，GABA T-3 影响神经元兴奋性、紧张性抑制以及整体 GABA 能回路的稳态。该转运体参与神经递质转运与离子偶联的跨膜转运过程，这些过程与谷氨酸–GABA 的代谢平衡及网络层面的振荡活动相互交织。GABA 清除失调及 SLC6A11 表达改变已在抑制性信号平衡受扰的神经精神与神经系统表型研究中受到关注，为探究 GABA 能功能障碍的机制提供了支持。

GABA T-3 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SLC6A11基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SLC6A11基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SLC6A11开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使GABA T-3蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建SLC6A11缺失的细胞模型，用于GABA T-3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 GABA T-3 功能至关重要的 SLC6A11 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 SLC6A11 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 GABA T-3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 GABA T-3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SLC6A11 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 GABA T-3 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 GABA T-3 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SLC6A11同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SLC6A11靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。