Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
G9a Antibody (C-9): sc-515726. Western blot analysis of G9a expression in SH-SY5Y (A), KNRK (B) and Neuro-2A (C) whole cell lysates.
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G9a双切口酶质粒(h): sc-402484-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- G9a 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- G9a双切酶质粒（h）和G9a双切酶质粒（h2）编码针对EHMT2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：G9a: sc-515726，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
G9a双切口酶质粒(h) | sc-402484-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
G9a双切口酶质粒(h2) | sc-402484-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EHMT2 编码赖氨酸甲基转移酶 G9a，它是 H3K9me1/2 的主要“写入酶”，可建立抑制性染色质，并在发育与谱系特化过程中维持稳定的基因沉默。G9a 在细胞核表观遗传复合体中发挥作用，协同调控染色质组织、转录程序、DNA 损伤应答，并与其他组蛋白及 DNA 甲基化通路进行串扰。EHMT2/G9a 活性异常与癌症生物学中广泛的转录失调、神经发育相关表型以及炎症信号密切相关，因此常被视为研究表观遗传可塑性的关键节点。研究 G9a 依赖的 H3K9 甲基化，有助于阐明染色质状态如何影响人类细胞的增殖、分化以及应激适应性的转录网络。
G9a 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EHMT2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EHMT2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EHMT2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EHMT2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。