Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
G6PD Antibody (G-12) Alexa Fluor® 647: sc-373886 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of G6PD expression in MCF7 (A), A549 (B), SK-BR-3 (C) and HeLa (D) whole cell lysates and human testis tissue extract (E). Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 488: sc-516790.
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G6PD双切口酶质粒(h): sc-401019-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- G6PD 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- G6PD双切酶质粒（h）和G6PD双切酶质粒（h2）编码针对G6PD的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：G6PD: sc-373886，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
G6PD双切口酶质粒(h) | sc-401019-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
G6PD双切口酶质粒(h2) | sc-401019-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 G6PD 基因编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，这是氧化型磷酸戊糖途径的限速酶，该途径可产生 NADPH 和核糖-5-磷酸。NADPH 支持还原性生物合成，并维持谷胱甘肽处于还原态，从而将 G6PD 活性与细胞氧化还原稳态及对氧化应激的防护联系起来。G6PD 的功能会影响代谢通量、核苷酸合成，以及红细胞和多种增殖性细胞类型对活性氧（ROS）的应答。遗传变异或酶活性降低与 G6PD 缺乏症相关，并可在特定情境下调节对氧化损伤和溶血性应激的易感性，因此 G6PD 是研究氧化还原生物学与代谢的核心靶点。
G6PD 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 G6PD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对G6PD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏G6PD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了G6PD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。