非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
FX 抗体 (43. 1): sc-100531. 对 HeLa 全细胞裂解液中 FX 的表达进行 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
FX双切口酶质粒(h): sc-408777-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FX 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- FX双切酶质粒（h）和FX双切酶质粒（h2）编码针对TSTA3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FX: sc-100531，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FX双切口酶质粒(h) | sc-408777-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FX双切口酶质粒(h2) | sc-408777-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TSTA3 编码 GDP-L-岩藻糖合成酶（FX），这是一种位于细胞质中的酶，催化从 GDP-甘露糖出发的 de novo（从头）GDP-岩藻糖生物合成途径的最后几个步骤。通过调控细胞内 GDP-岩藻糖的可用性，FX 支持细胞表面及分泌蛋白糖链的岩藻糖基化，从而影响蛋白折叠、受体–配体相互作用以及细胞外基质的通讯。岩藻糖基化的改变与细胞黏附和信号传导的变化相关，并与免疫调节、炎症以及肿瘤相关糖链重塑有关。因此，TSTA3 的破坏或失调可能影响依赖糖基化的通路，从而塑造发育过程及疾病相关的细胞表型。
FX 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TSTA3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TSTA3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TSTA3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TSTA3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。