Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
FUCA2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405221
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FUCA2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在FUCA2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FUCA2: sc-514038，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FUCA2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-405221 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
FUCA2 编码 α-L-岩藻糖苷酶 2（alpha-L-fucosidase 2），这是一种分泌型、溶酶体样糖苷水解酶，可从 N-连接和 O-连接的糖缀合物以及糖脂中水解去除末端岩藻糖残基，从而参与糖链的分解代谢与重塑。通过调控细胞表面及细胞外基质蛋白的岩藻糖基化状态，FUCA2 可影响受体周转、细胞–细胞黏附以及与免疫相关的糖链信号传导等过程。岩藻糖代谢与岩藻糖苷酶活性的改变已被认为与炎症反应的变化及肿瘤相关的糖基化模式改变有关，因此 FUCA2 是研究糖组学驱动表型的一个有用节点。功能研究通常聚焦于 FUCA2 依赖的去岩藻糖基化如何影响细胞内转运、溶酶体功能以及由糖蛋白介导的信号通路。
FUCA2 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中FUCA2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对FUCA2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏FUCA2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FUCA2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建FUCA2缺失的细胞模型，用于FUCA2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 FUCA2 功能至关重要的 FUCA2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 FUCA2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 FUCA2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FUCA2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 FUCA2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 FUCA2 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FUCA2 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由FUCA2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定FUCA2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。