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FOXP2CRISPR激活质粒(m) | sc-431094-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
Foxp2 编码叉头框(forkhead box)转录因子 FOXP2。FOXP2 是一种序列特异性的调控因子,负责协调控制神经元分化、迁移以及突触可塑性的基因程序。在小鼠神经系统中,FOXP2 在皮层—基底节和小脑环路中高水平表达,在这些回路里,它会影响与运动学习和发声相关行为密切相关的、依赖神经活动的转录与连接性。FOXP2 还与更广泛的转录调控与染色质调控网络整合,共同塑造发育时序与神经环路成熟。FOXP2 依赖的基因表达一旦失调,已被证实与异常的神经发育表型相关,并为研究脑发育与脑功能中的转录调控机制提供了一个重要切入点。
FOXP2 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Foxp2的表达。
FOXP2 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Foxp2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Foxp2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性FOXP2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Foxp2位点,并能够研究内源性位点上依赖于FOXP2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Foxp2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟FOXP2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。