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Flotillin-2双切口酶质粒(m) | sc-420382-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Flot2 编码 flotillin-2,这是一种与脂筏相关的支架蛋白,主要富集于质膜以及内体等细胞器区室,在这些部位帮助组织膜微区。Flotillin-2 通过协调受体内吞及其下游激酶通路(包括 MAPK 和 PI3K/AKT 信号)参与网格蛋白非依赖性内吞、膜运输与信号转导。它还可通过与类小窝结构域及细胞骨架调控因子的相互作用,影响肌动蛋白细胞骨架动态、细胞黏附与迁移。flotillin-2 的表达或定位异常与肿瘤生物学中增殖和侵袭表型失调,以及神经元和免疫细胞信号传导紊乱有关,提示其在机制性疾病模型研究中具有重要意义。
Flotillin-2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Flot2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Flot2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Flot2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Flot2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。