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Flotillin-1双切口酶质粒(m) | sc-420381-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Flotillin-1双切口酶质粒(m2) | sc-420381-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Flot1 编码 flotillin-1,这是一种与脂筏相关的支架蛋白,富集于质膜及内体等细胞器区室,在这些部位组织膜微区。Flotillin-1 通过协调受体聚集与细胞骨架相互作用,参与网格蛋白非依赖性内吞、囊泡运输和信号转导,从而影响 EGFR/MAPK、PI3K/AKT 等通路。在小鼠细胞中,Flot1 通过依赖脂筏的蛋白分选,参与免疫信号传递、神经元与胶质细胞膜结构组织,并调控细胞黏附与迁移。Flotillin-1 的丰度或定位发生改变与膜运输和信号传导失调的表型相关,这些表型与肿瘤发生过程、神经生物学以及炎症性疾病模型具有关联。
Flotillin-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Flot1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Flot1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Flot1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Flot1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。