FLAD1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406725

概述

FLAD1 编码黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶 1（FAD synthetase 1），这是一种双功能酶，可催化 FMN 的腺苷化生成 FAD。FAD 是关键的氧化还原辅因子，众多线粒体和胞质黄素蛋白都依赖它。通过调控细胞内 FAD 的可用性，FLAD1 维持氧化代谢、电子传递反应、脂肪酸 β-氧化以及更广泛的线粒体稳态，将微量营养素来源的核黄素代谢与能量产生和氧化还原平衡联系起来。FAD 合成的扰动会破坏依赖黄素蛋白的通路，改变活性氧（ROS）的处理能力，并削弱生物能量供给。人类遗传学与功能研究证据表明，FLAD1 功能异常与黄素代谢先天性缺陷及线粒体疾病表型相关，因此与代谢应激和线粒体生物学研究密切相关。

FLAD1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中FLAD1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对FLAD1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏FLAD1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FLAD1蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建FLAD1缺失的细胞模型，用于FLAD1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 FLAD1 功能至关重要的 FLAD1 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 FLAD1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 FLAD1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FLAD1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 FLAD1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 FLAD1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FLAD1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由FLAD1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定FLAD1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。