Date published: 2026-7-21

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Filamin 1双切口酶质粒(m): sc-431396-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Filamin 1 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Filamin 1双切酶质粒(m)和Filamin 1双切酶质粒(m2)编码针对Flna的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Filamin 1: sc-17749,通过WB, IF或者IHC分析
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    Filamin 1双切口酶质粒(m)

    sc-431396-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Flna 基因编码丝状蛋白 1(filamin 1),这是一种大型的肌动蛋白结合型支架蛋白,可交联 F-肌动蛋白(F-actin)网络,并协调膜受体信号与细胞骨架重塑。Filamin 1 通过组织由整合素(integrins)、小 GTP 酶以及多种跨膜受体参与的复合物,调控细胞形态、黏附与力学信号转导(mechanotransduction),从而影响细胞迁移与组织形态发生。在多种细胞类型中,依赖 FLNA 的细胞骨架动态与调控黏着斑(focal adhesion)周转和力传递的通路相互交织,使 Flna 成为决定细胞极性与运动程序的关键因素。Filamin 1 的破坏或调控异常与发育异常及疾病相关表型有关,这些表型通常与异常细胞迁移以及血管或结缔组织缺陷相关,因而支持将其作为以细胞骨架为核心研究中的机制枢纽。

    Filamin 1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Flna 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Flna内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Flna的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Flna基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。