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Filamin 1双切口酶质粒(h) | sc-400557-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Filamin 1双切口酶质粒(h2) | sc-400557-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FLNA 编码丝状蛋白1(filamin 1),这是一种大型肌动蛋白结合型支架蛋白,可将 F-肌动蛋白(F-actin)交联成正交网络,并把细胞骨架与跨膜受体及信号复合体耦联起来。通过与整合素(integrins)、离子通道以及受小 GTP 酶调控的效应蛋白相互作用,丝状蛋白1在细胞迁移和组织构建过程中影响黏着斑周转、机械信号转导以及细胞极性。依赖 FLNA 的皮质肌动蛋白重塑支持内吞与囊泡运输,并有助于协调 Rho/Rac 信号与膜动力学。FLNA 的破坏或调控异常与发育性疾病和神经血管疾病相关,并常在细胞骨架失调、屏障完整性及侵袭相关表型等研究背景下被重点关注。
Filamin 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FLNA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FLNA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FLNA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FLNA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。