Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FIH-1 Antibody (F-11): sc-365128. Western blot analysis of FIH-1 expression in Sol8 nuclear extract (A) and A-375 (B), HL-60 (C), HEK293 (D), A-431 (E) and Raji (F) whole cell lysates.
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FIH-1双切口酶质粒(m): sc-435640-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FIH-1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- FIH-1双切酶质粒（m）和FIH-1双切酶质粒（m2）编码针对Hif1an的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FIH-1: sc-271780，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FIH-1双切口酶质粒(m) | sc-435640-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FIH-1双切口酶质粒(m2) | sc-435640-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Hif1an 基因编码缺氧诱导因子 1 抑制因子（FIH-1），这是一种天冬酰胺羟化酶，能够以氧依赖方式修饰 HIF-1α 及相关底物，从而抑制缺氧诱导的转录程序。FIH-1 通过羟化 HIF-1α C 端转录激活结构域中的关键天冬酰胺残基，限制共激活因子的募集，并精细调控与血管生成、糖酵解代谢、红细胞生成以及细胞对低氧适应相关基因的表达。除 HIF 信号通路之外，FIH-1 还可通过羟化含 ankyrin 重复序列的蛋白，与更广泛的蛋白相互作用调控和应激反应相关联。HIF 通路调控失衡与肿瘤缺氧生物学、炎症信号、代谢重塑以及缺血相关的组织反应密切相关，因此 Hif1an 是开展机制研究的一个有价值节点。
FIH-1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Hif1an 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hif1an内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Hif1an的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Hif1an基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。