Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
FIG4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404404
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FIG4 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在FIG4基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FIG4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404404 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
FIG4 编码一种磷脂酰肌醇 5-磷酸酶，负责调控内溶酶体膜上磷脂酰肌醇 3,5-二磷酸（PI(3,5)P2）及相关脂质的代谢周转。FIG4 通过参与 PIKfyve–VAC14–FIG4 调控复合物，影响内体向溶酶体转运、自噬、膜回收以及溶酶体稳态的维持。FIG4 活性的扰动会破坏内溶酶体动态与细胞应激反应，而这些过程对神经元维持和髓鞘完整性至关重要。人类遗传学研究已将 FIG4 功能障碍与神经退行性及神经发育相关表型联系起来，进一步支持其在与神经系统生物学相关的膜运输通路中的重要作用。
FIG4 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中FIG4基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对FIG4基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏FIG4开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FIG4蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建FIG4缺失的细胞模型，用于FIG4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 FIG4 功能至关重要的 FIG4 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 FIG4 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 FIG4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FIG4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 FIG4 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 FIG4 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FIG4 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由FIG4同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定FIG4靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。