Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Fibulin-3 Antibody (C-3): sc-365224. Western blot analysis of Fibulin-3 expression in HUV-EC-C (A) and A549 (B) whole cell lysates.
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Fibulin-3双切口酶质粒(h): sc-401978-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Fibulin-3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Fibulin-3双切酶质粒（h）和Fibulin-3双切酶质粒（h2）编码针对EFEMP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Fibulin-3: sc-365224，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Fibulin-3双切口酶质粒(h) | sc-401978-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Fibulin-3双切口酶质粒(h2) | sc-401978-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EFEMP1 编码纤维蛋白样蛋白-3（fibulin-3），这是一种分泌型细胞外基质（ECM）糖蛋白，可与弹性纤维网络及基底膜结构相互关联。Fibulin-3 调控细胞–基质相互作用、组织重塑以及蛋白酶平衡，包括对金属蛋白酶活性进行调节，并与 TGF-β、EGFR 等影响黏附、迁移与应激反应的信号通路发生串扰。EFEMP1 的表达与眼部、血管及上皮组织的细胞外基质稳态相关；其失调也常在异常基质沉积、蛋白质稳态受损以及血管生成信号改变等背景下被研究。这些特性使 EFEMP1 成为开展 ECM 驱动的细胞行为与微环境依赖表型机制研究的有用靶点。
Fibulin-3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EFEMP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EFEMP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EFEMP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EFEMP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。