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Fibulin-1双切口酶质粒(h) | sc-401754-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Fibulin-1双切口酶质粒(h2) | sc-401754-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FBLN1 编码 fibulin-1,这是一种分泌型细胞外基质糖蛋白,可与弹性纤维、基底膜成分及多种蛋白聚糖相互作用,从而影响基质组织结构与组织力学性质。Fibulin-1 参与细胞—基质黏附与重塑过程,并与整合素相关信号、创伤修复程序以及血管细胞外基质稳态等通路相交汇。在纤维化和心血管重构背景下已有研究报道 FBLN1 表达及基质沉积发生改变,而细胞外基质结构失衡也被认为与肿瘤微环境生物学有关。因此,FBLN1 常被作为连接细胞外基质组装与细胞迁移、增殖及力学信号转导(mechanotransduction)的结构与调控枢纽进行研究。
Fibulin-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FBLN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FBLN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FBLN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FBLN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。